超分辨荧光显微成像技术单分子定位荧光显微成像包括光激活定位显微(PALM)和随机光学重构显微(STORM)。两者的原理相似,成像过程均需要往复循环,在每个循环周期里,荧光分子团被连续的激活、成像及漂白。PALM工作原理光激活定位显微技术photoactivated localization microscopy(PALM)其基本原理是首先使用光活化绿色荧光蛋白(PA-GFP)来标记蛋白质,并将较低光功率的405nm 激光照射细胞表面,用于激活稀疏分布的几个荧光分子。之后用561nm激光照射,使已经激活的荧光分子因为受激发射而产生荧光信号,接着继续照射使这些发光的荧光分子产生漂白, 在下一轮不能 ...
M高速像增强荧光相机用于斑马鱼心脏的高速活体成像技术在德国巴德诺海姆的Max Planck心肺研究所,人们对斑马鱼的心血管系统进行了研究。斑马鱼的透明度(图1)及其实验优势使其成为人体心血管系统的理想比例模型。图1 斑马鱼的照片。心脏位于红色方块内为了研究斑马鱼的血液流动,血红细胞被荧光蛋白DsRed标记。荧光的强度受到附着在红细胞上的荧光蛋白数量的限制。此外,光线发射的方向是随机的,这进一步减少了到达相机的光量。低光强度不一定存在问题,增加曝光时间来捕捉足够的光是一个常用的解决方法,这通常被用于成像固定的昏暗物体。然而,在移动物体上使用相同的方法会导致图像模糊。试想一条活的斑马鱼,它的内脏是 ...
LIFA荧光寿命成像在微流体中的运用——研究氧在湿滑气液界面上的输运微流体提供了一个理想的平台,允许集成“可控”的表面和直接测量附近的传输现象。Elif Karatay在特文特大学攻读博士学位期间使用微流体气泡垫层,制作了其中一个微通道壁作为由交替固体壁和微气泡组成的超疏水表面(图1)。她通过荧光寿命成像显微镜实验测量和数值估计了在短接触时间内稳定气液界面上气体吸收的动态传质。图1 (a)微流控气泡垫。(b)FLIM实验中相同设置下水中溶解氧的数值模拟,颜色条表示氧的浓度。(c)由FLIM解析的寿命场叠加在亮场显微镜图像上,显示气泡进入到水中,颜色条表示荧光寿命,以纳秒为单位。通过频域荧光寿命 ...
术包括X射线荧光光谱,激光诱导击穿光谱,可见光到近红外(VIS-NIR)和中红外(MIR)光谱。在光谱预处理和多变量建模的帮助下,使用单个传感器成功估计了各种土壤特性,例如SOC。尽管使用单个传感器进行土壤研究的研究显示出有希望的结果,但没有一个单独的传感器可以充分捕获土壤的复杂性。因此,每种技术的单个光谱范围可能没有足够的信息来为特定土壤性质提供合理的预测精度。提高预测元素准确性的一种可行方法是合并和整合来自多个传感器的数据,这称为数据融合。VIS-NIR和MIR光谱技术都显示出确定SOC的巨大潜力,VIS-NIR和MIR光谱的数据融合在改善SOC估计方面的潜力值得探索。已经提出并探索了不同 ...
某些物质产生荧光。2.3 γ射线的产生及性质γ射线是由放射性物质(Co、Ir等)内部原子核的衰变过程产生的。γ射线的性质与X射线相似,由于其波长比X射线短,因而射线能量高,具有更大的穿透力。例如,目前广泛使用的γ射线源Co,它可以检查250mm厚的铜质工件、350mm厚的铝制工件和300mm厚的钢制工件。2.4. 射线当射线穿透物质时,由于物质对射线有吸收和散射作用,从而引起射线能量的衰减。射线在物质中的衰减是按照射线强度的衰减是呈负指数规律变化的,以强度为I的一束平行射线束穿过厚度为δ的物质为例,穿过物质后的射线强度为:I=Ie式中I—-射线透过厚度δ的物质的射线强度;I—-射线的初始强度; ...
性,而不需要荧光标签。样品可以以完全无接触和无标签的方式被询问,防止对系统的破话。红外(IR)光谱是另一种常用的获得振动光谱的方法。红外光谱和拉曼光谱的选择规则是不同的;红外光谱对偶极子的变化很敏感,而拉曼光谱对偏振性的变化很敏感。这使得红外和拉曼成为一组特定化学键的良好工具。对于成像和显微镜的国产成人在线观看免费网站,在选择红外或拉曼光谱时,还有两个重要因素需要考虑。1)空间分辨率要求。红外光谱法使用红外光作为光源。拉曼可以使用可见光或近红外(NIR)激光器进行激发。由于可见或近红外激光器的波长更短,拉曼显微镜的空间分辨率可以达到亚微米级。另一方面,红外光的波长为几微米。对于许多显微镜的国产成人在线观看免费网站来说,其空间分辨率被 ...
能够充分激发荧光团。在比较单束和五束成像模式的实验中,我们将DOE保留在原位,并在两种实验中生成5个小波束,它的区别是在单束实验中,我们简单地在中间成像平面放置一个简单的虹膜隔膜,作为四个小波束路径上的屏障,只允许一个通过)。在这些条件下,在800 nm处,单个中心光束对样品的功率为24 mW,而所有五束光的功率之和对样品的功率为108 mW,其他四束的平均功率为21 mW,每个都在平均值的5%以内。检镜扫描与单光束双光子光栅扫描成像相同,并使用放大光电倍增管(PMT)进行检测(PMT: H7422-P40 Hamamatsu, Bridgewater, NJ, USA;放大器:信号恢复AME ...
深度易受背景荧光影响对背景荧光免疫全光谱选定的光谱信息表2.CARS和SRS的比较CARSSRS参数化过程能量传递过程新光频信号透射激励光束的强度增益和损耗非特定的非共振背景无非共振背景扭曲的光谱与自发拉曼光谱相同相干图像伪影信号是物体与点扩散函数的卷积非线性浓度依赖性线性浓度依赖性CARS的产生条件与SRS相同,但检测方法不同。在SRS中,可以检测到激励束的强度增益和强度损失,而在CARS,反斯托克斯频率下的新辐射ωaS = 2ωp−ωS 。CARS是由被称为四波混合的光学参量过程产生的,在这个过程中能量在光场之间交换。这与SRS相反,SRS是光场和样品之间的能量传递过程。这解释了为什么如果 ...
如双光子激发荧光和二次谐波产生(SHG)显微镜,需要一个单一的激发光束。早期大多数CARS显微镜使用了两个独立的电子同步皮秒Ti:sapphire振荡器,导致系统非常庞大和复杂。这很快就被目前单频CRS显微镜中的“金标准”所取代,该标准由皮秒Nd:YVO4振荡器同步泵浦光学参数振荡器(OPO)组成,这种激光系统的复杂性促使人们进行了密集的研究,旨在大幅减少占地面积和价格,同时提高可靠性,其主要是通过光纤格式架构。一类系统是基于飞秒Er:光纤振荡器在1550 nm,播种一对掺铒光纤放大器,其中一个是高度非线性光纤。通过对厚SHG晶体中的两个脉冲序列进行频率倍增和频谱压缩,可以合成775 nm的皮 ...
近调谐时,为荧光标记目的开发的荧光团显示高达倍的振动响应的出色增强。结果是这种荧光探针可以通过CRS工艺在亚微米浓度下检测到。这是重要的,因为它开辟了在多标签样品中映射不同探针的可能性,不同探针的数量受限于拉曼线的带宽,而不是荧光的带宽。由于检测通道之间的串扰,在荧光显微镜中使用四个以上探针标记样品具有挑战性,而在共振增强SRS成像中,多探针标记可以扩展到数十个不同的探针。就多重成像而言,这种能力是一个巨大的胜利,因为许多细胞生物学研究需要多个分子参与者的可视化来揭示细胞内的过程和途径。通过共振增强SRS提供的多路复用能力可以进一步推动到更低的探针浓度。通过让探针选择性仅由SRS激发过程决定, ...
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